204チーム(208校)参加の第100回全国高校サッカー選手権大阪予選の2回戦2日目が9月26日に行われた。

　アサンプションは2-0で千里青雲に完封勝ち。三島は27-0で東淀工に、北かわち皐が丘は柴島に18-0でそれぞれ大勝した。茨木は泉陽に1-0で辛くも勝利。泉大津は山本に3-0で完勝した。その他、槻の木、大冠、夕陽丘、刀根山などが3回戦に駒を進めた

　なお、今大会も新型コロナウイルスの感染拡大の状況を鑑み、日程・会場が非公開の上、無観客での開催となっている。

【3回戦からの登場】
賢明学院、大阪商大高、河南、大阪朝鮮高級学校、関大北陽、香里ヌヴェール学院、初芝立命館、帝塚山泉ヶ丘、大体大浪商、摂津、桜宮、大阪偕星学園、堺西、大阪商大堺、清明学院、大商学園