9月4日、第95回全国高校サッカー選手権大阪予選の2回戦が各会場で開催された。

　柏原東と上宮太子の一戦は上宮太子が4-1で勝利し次戦で今大会初登場となる摂津に挑む。大阪朝鮮高級学校は8-0で枚岡樟風に勝利し次戦で3回戦からの登場の桜宮と戦う。大阪偕星学園は泉尾に15-0で勝利し初戦に続き完封勝ちで次戦に駒を進めた。また、佐野と茨木西の一戦はPK戦の末に佐野が勝利し2回戦突破を決めている。

　2回戦の結果は以下の通り。尚、続く3回戦は9月10日に行われ関大北陽、東大阪大柏原らが初戦を迎える。

2回戦

日程	対戦カード
2016.09.04	三島	3 - 0 試合終了	千里青雲	(0)
2016.09.04	四條畷	2 - 0 試合終了	芥川	(2)
2016.09.04	和泉	2 - 1 試合終了	箕面自由学園	(0)
2016.09.04	高槻	0 - 7 試合終了	汎愛	(0)
2016.09.04	箕面東	4 - 2 試合終了	常翔啓光学園	(0)
2016.09.04	市岡	1 - 0 試合終了	大阪教育大附	(0)
2016.09.04	島本	2 - 1 試合終了	寝屋川	(0)
2016.09.04	長吉	0 - 8 試合終了	久米田	(0)
2016.09.04	帝塚山泉ヶ丘	6 - 0 試合終了	門真西/吹田	(0)
2016.09.04	高石	4 - 0 試合終了	大正	(0)
2016.09.04	明星	0 - 2 試合終了	大冠	(0)
2016.09.04	北淀	0 - 17 試合終了	東住吉	(0)
2016.09.04	大阪商大堺	6 - 0 試合終了	枚方なぎさ	(1)
2016.09.04	上宮	1 - 1PK 4 - 1 試合終了	東住吉総合	(0)
2016.09.04	常翔学園	8 - 0 試合終了	登美丘	(0)
2016.09.04	槻の木	1 - 0 試合終了	浪速	(0)
2016.09.04	関西大倉	6 - 1 試合終了	東大谷	(0)
2016.09.04	西成	5 - 0 試合終了	平野	(0)
2016.09.04	柏原東	1 - 4 試合終了	上宮太子	(0)
2016.09.04	鳳	0 - 2 試合終了	金蘭千里	(0)
2016.09.04	追手門学院	1 - 0 試合終了	大阪商大高	(0)
2016.09.04	旭	0 - 2 試合終了	高槻北	(0)
2016.09.04	北摂つばさ	0 - 4 試合終了	枚方津田	(0)
2016.09.04	泉北	4 - 0 試合終了	府立高専	(0)
2016.09.04	布施	2 - 0 試合終了	貝塚	(0)
2016.09.04	清風南海	0 - 3 試合終了	八尾翠翔	(0)
2016.09.04	生野工	0 - 6 試合終了	岸和田	(0)
2016.09.04	泉尾	0 - 15 試合終了	大阪偕星学園	(0)
2016.09.04	金光藤蔭	1 - 2 試合終了	泉陽	(0)
2016.09.04	金剛	0 - 1 試合終了	河南	(0)
2016.09.04	成城	0 - 2 試合終了	牧野	(0)
2016.09.04	金岡	1 - 0 試合終了	堺東	(0)
2016.09.04	枚岡樟風	0 - 8 試合終了	大阪朝鮮高級学校	(0)
2016.09.04	大塚	4 - 2 試合終了	阪南	(0)
2016.09.04	佐野	0 - 0PK 5 - 3 試合終了	茨木西	(0)
2016.09.04	精華	2 - 5 試合終了	大阪学芸	(0)
2016.09.04	OBFC	2 - 0 試合終了	芦間	(0)
2016.09.04	藤井寺	2 - 1 試合終了	吹田東	(0)
2016.09.04	八尾	2 - 1 試合終了	北野	(0)
2016.09.04	泉総合・伯太（合同チーム）	0 - 14 試合終了	淀川工科	(0)
2016.09.04	柴島	0 - 3 試合終了	池田	(0)
2016.09.04	池田北	0 - 6 試合終了	大阪	(0)
2016.09.04	日新	1 - 1PK 3 - 4 試合終了	桜塚	(0)
2016.09.04	北かわち皐が丘	0 - 0PK 7 - 6 試合終了	大手前	(0)
2016.09.04	刀根山	4 - 0 試合終了	長野	(0)
2016.09.04	守口東	1 - 0 試合終了	大阪星光学院	(0)
2016.09.04	福泉	1 - 6 試合終了	長尾	(0)
2016.09.04	東百舌鳥	0 - 1 試合終了	城東工科	(0)
2016.09.04	緑風冠	6 - 0 試合終了	岸和田産	(0)
2016.09.04	狭山	0 - 4 試合終了	大阪市立	(0)
2016.09.04	大阪青陵	0 - 0PK 12 - 11 試合終了	阿倍野	(0)
2016.09.04	英真学園	2 - 4 試合終了	箕面学園	(0)
2016.09.04	春日丘	0 - 3 試合終了	北千里	(0)
2016.09.04	生野	3 - 0 試合終了	門真なみはや	(0)
2016.09.04	四天羽	0 - 12 試合終了	山田	(0)
2016.09.04	信太	0 - 0PK 4 - 1 試合終了	泉大津	(0)
2016.09.04	初芝富田林	0 - 4 試合終了	東淀川	(0)
2016.09.04	大阪園芸中等	0 - 14 試合終了	堺	(0)
2016.09.04	美原	1 - 1PK 4 - 5 試合終了	日根野	(0)
2016.09.04	今宮工科	3 - 3PK 3 - 4 試合終了	西野田工科	(0)
2016.09.04	渋谷	0 - 1 試合終了	豊中	(0)
2016.09.04	淀商	0 - 9 試合終了	箕面	(0)